DNA复制过程 概括版：DNA解旋酶解helicase开双链，形成replicaation fork。每条单链作为模板，从5’→3’方向，primerase作用，primer结合。DNA聚合酶1开始从5’→3’连续合成，添加碱基；另一条模板链的互补链为冈崎片段。合成好新的DNA片段后，exonuclease核酸外切酶除去引物，再由DNA聚合酶3填补空缺，DNA lignase使双链形成连续的链。 引物 DNA聚合酶的特点是不能从头开始合成，要从3’端的羟基起始复制。primase（合成primer的酶），它一开始与复制起始复合体结合，会产生一条10-13nt长的RNA链，而这条链就是会产生一个3'-OH来，让DNA聚合酶开始合成。而在复制过程中，RNA引物在利用完后会被酶切除。而RNA聚合酶（就是用于合成RNA的酶）能从头合成一段RNA。 qPCR的概念
四环素(Tet)诱导调控表达系统，是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的一种用于诱导基因表达的调控系统。目前，此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。
简单地说，Tet诱导调控表达系统的基本原理是由诱导药物如Tet改变调控蛋白质的构象，从而控制目的蛋白的表达。研究人员利用TetR和TetO特异结合的特性，发展出了多种类型的Tet调控系统，根据其表达特点可以归为两大类：激活性系统Tet-on和抑制型系统Tet-off。
Tet-off原理
tTA是由TetR和病毒转录激活域VP16融合而成的蛋白。当不存在Dox时， tTA和TRE（7个重复的TetO序列）结合，启动下游基因表达；当存在Dox时，tTA的构象发生改变，tTA会TRE上脱落，从而导致下游基因表达关闭。
Tet-on原理
rtTA是由rTetR和VP16融合而成的蛋白，它的表型与tTA相反 。当Dox不存在时，rtTA不能结合TRE, 下游基因表达关闭。当存在Dox时，rtTA的构象发生改变，rtTA集合TRE，下游基因表达开启。